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          血液/循環(huán)核酸提取方案

          更新時間:2020-05-06瀏覽:3112次

          每當(dāng)聽到要提取血液樣本的核酸

          你是不是也和我一樣有一種一臉懵的感覺?

          是哪種物種的血?

          (哺乳動物,禽類,還是兩棲類?)

          是什么類型的樣本?

          (新鮮血液,血凝塊,凍存血,干血斑,血清血漿…)

          樣本體積多大?

          如何選擇提取方法?

          ……

          血液/循環(huán)核酸提取方案

          馬上告訴你答案!

           

          血液核酸提取方案

          樣本特點: 

          材料成分復(fù)雜:血液樣本中包含紅細(xì)胞、白細(xì)胞、蛋白質(zhì)、血小板等,提取時要保證裂解充分的同時去除無關(guān)雜質(zhì)。

          樣本保存:

          新鮮血液可直接收集于抗凝血管,保存于-20℃。大體積血液,可先裂紅,將收集到的白細(xì)胞-20℃保存,保存效果更加。

          血液中RNA在室溫兩小時即會被降解,選擇新鮮血液進(jìn)行提取

          。如有需長期保存,建議選擇RNA穩(wěn)定劑RNALock 血液RNA穩(wěn)定劑 (DP440,TIANGEN)進(jìn)行處理,處理后的血液可在常溫保存2天,4℃保存1周,-20℃度保存半年。

          小體積(200μl)血液DNA提取方案:

          大體積(0.25-5ml)血液DNA提取方案:

          血液RNA提取方案:

          干血斑核酸提取方案

           

          樣本特點

          紙片吸附血液樣本有限,充分裂解后進(jìn)行離心,需要盡可能提高提取得率和純度。

          樣本保存

          常溫保存

          干血斑DNA提取方案

           循環(huán)核酸提取方案

          樣本特點

          循環(huán)核酸在血清/血漿等體液中的含量很低,在腫瘤等疾病分析中樣品珍貴,對提取得率要求很高。

          樣本保存

          用于提取循環(huán)核酸的血清、血漿樣本,應(yīng)使用可以穩(wěn)定樣本中白細(xì)胞的血液保存管進(jìn)行儲存,盡可能減少在保存過程中因白細(xì)胞破裂釋放基因組DNA,干擾循環(huán)核酸提取及下游檢測實驗結(jié)果。

          循環(huán)核酸DNA提取方案

           

           

           

           

           

           

           

           

           

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